「假阳性」爆炸!54名乘客因新冠肺炎“假阳性”而在机场被拘留,并怀疑“样本被污染”

原标题:爆炸!54名乘客因新冠肺炎“假阳性”而在机场被拘留,并怀疑“样本被污染”

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假阳性

假阳性(网络配图 侵删)

  上述54名乘客自英国伦敦乘坐班机出发,目的地为中国上海,飞机于当天下午到达丹麦哥本哈根机场转机。

  根据当地防疫要求,全机人员进行核酸检测。但在该航班起飞前,机上200名乘客中的54人却接到机场方面的通知,称检测结果为“阳性”,无法登机前往上海,需要就地隔离或是返回英国。

假阳性

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  这54名乘客大多数为中国留学生,滞留乘客认为:这一集体“阳性”事件应当被认定为重大医疗误诊!

假阳性

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  留学生李女士介绍,当天初次核酸检测阳性的有54人,但当时机场的工作人员并未给到他们纸质的检测报告,而是口头通知他们为阳性(后经大使馆协调才拿到纸质报告),并让他们根据防疫要求到丹麦酒店进行隔离或是买机票返回英国。

假阳性

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  阳性报告

  李女士表示,根据防疫要求,机上所有乘客于起飞前7天和48小时内,在英国做了双核酸检测或者核酸IgMN蛋白三检,才拿到中国驻英国大使馆出具的绿码乘机。

  因此,对于哥本哈根机场的核酸“阳性”结果,众多乘客提出了质疑。在集体要求下,当晚所有滞留人员又再次支付25英镑进行一对一的快速核酸检测,检测结果全变成“阴性”。

  此时,中国驻丹麦大使馆工作人员赶到现场。在使馆方面的协调下,滞留人员拿到两份“一阳一阴”的报告,但飞往国内的航班已经飞走。

假阳性

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  阴性报告

  在这么短的时间内

  核酸检测结果阴阳反转

  究竟哪里出了问题?

  滞留乘客在复盘事件时发现,飞机上有近200人,而54名“阳性”人员虽坐在飞机的不同区域,但均由同一位检测人员进行检测。他们有理由怀疑:一次医疗误诊事件。

  乘客Wendy介绍,这名检测人员是一位年龄较大的女护士,其检测速度较快,“检测棉签是干爽又白净的,而这位护士用的棉签是黄褐色的,湿漉漉的。”

  前述李女士也称,因这位护士处没人排队,便被拉到此处检测,且在进行检测时,该人员操作不规范,“口罩只戴了一半,鼻子露在外面,不戴手套,手部没有消毒就直接撕开检测包装。”

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  那么,新冠核酸检测“假阳性”除了在采样过程中出现的污染之外,在实验室检测过程中还有哪些因素会导致“假阳性”呢?

  出现假阳性的原因主要有以下几个方面:

  1.引物设计不合适

  选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的基因序列。但在临床实际中,由于基本使用的是成品试剂盒,引物设计不合适的情况一般不会出现,但个别厂家试剂仍存在非特异性扩增现象,建议在使用前进行性能评价,比对筛选。

  2.靶序列或扩增产物的交叉污染

  这种污染有两种原因,第一是整个基因组或大片段的交叉污染导致假阳性。第二是空气中的小片段核酸污染,虽然这些小片段比靶基因序列短,但有一定的同源性。互相拼接后与引物互补结合,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生。在规范操作的前提下,应该尽量避免第二种情况的发生。

  3.标本间交叉污染

  标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。  

  4.PCR试剂的污染

  主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。

  5.实验室中克隆质粒的污染

  试剂盒中的阳性对照参与核酸提取过程造成交叉污染,一些试剂盒为了监控核酸提取过程的质量,要求将试剂盒中的阳性对照(含有目的基因的假病毒)与样本一起进行核酸提取,自动化的核酸提取仪由于加温、振动等过程,在操作过程中气溶胶可能会污染提取仪。

  有的实验室可能会将提取的核酸样本板加膜保存,以备扩增,再次打开封膜的样本板时可能会造成交叉污染。因此,不建议对提取后的样本核酸封膜保存,最好立即检测,同时,应对每一批提取后的仪器用75%酒精擦拭。

假阳性

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  当PCR实验结果出现假阳性的时候,我们常常会考虑是不是引物、反应液、移液器等污染模板,然后需要一一排查,费时费力。

  其实产生这一现象最常见的原因是核酸气溶胶。离心机离心、剧烈地摇动反应管、PCR开盖、移液器的反复吹打等会产生空气与液体表面摩擦的情况,都会产生核酸气溶胶,也就是实验室里(或移液器腔内)弥漫着含有长短不一核酸片段的小颗粒,这些小颗粒沉降到样本中导致最后扩增出了假阳性荧光曲线。

  可想而知,这些核酸小颗粒还会落到实验台面、PCR仪、移液器、吸头盒等等地方,如果我们不注意,这些核酸小颗粒就会日积月累地积聚,当实验室里核酸气溶胶的浓度达到一定浓度,就会造成实验室的污染进而产生PCR实验结果的假阳性。

假阳性

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  细节决定成败,尤其对于实验环境和操作要求极高的核酸实验室,任何一个环节做不好都可能影响整个实验结果。我们所有检验人员只有把防污染思想贯彻于整个实验过程中,才能有效避免假阳性的产生,保证准确的核酸检测结果。

  图源:红星新闻等

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